氣相色譜法測(cè)珍珠滴丸中冰片含量及穩(wěn)定性研究

　　【摘要】目的：建立氣相色譜測(cè)定珍珠滴丸中冰片含量的方法，并用該方法對(duì)制劑中冰片的穩(wěn)定性進(jìn)行研究。方法：以FFAP大口徑石英毛細(xì)管柱(30m×0.53mm，0.5μm)為色譜柱，高純氮?dú)?99.999%)為載氣;柱前壓20kPa，柱溫130℃，進(jìn)樣口溫度220℃，氫火焰離子化檢測(cè)器溫度250℃;氫氣(99.99%)流量為40ml/min，空氣流量為400ml/min。結(jié)果：龍腦在0.25～0.75g/L線性關(guān)系良好，r=0.9999，加樣回收率為99.33%,RSD為1.4%。結(jié)論：氣相色譜法可作為珍珠滴丸的質(zhì)量控制方法;制劑中冰片在30℃以下放置基本穩(wěn)定，應(yīng)避免高溫環(huán)境。

　　【關(guān)鍵詞】珍珠;冰片;色譜法，氣相;珍珠滴丸

　　珍珠滴丸是在傳統(tǒng)民間驗(yàn)方基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代大孔樹(shù)脂分離技術(shù)和滴丸制劑技術(shù)研制開(kāi)發(fā)的作用迅速、質(zhì)量穩(wěn)定且可控的中藥新藥，臨床用于治療復(fù)發(fā)性口腔潰瘍[1]。本方由羊耳菊、珍珠、冰片等藥味組成，具有辛散苦瀉、清熱涼血、止痛等作用。其中冰片為合成龍腦，主要含龍腦、異龍腦[2]。中醫(yī)認(rèn)為冰片味辛、苦，歸心、脾、肺經(jīng)，有開(kāi)竅醒神、清熱止痛、生肌之功�，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，冰片具有抗菌、抗炎、止痛的功效。為控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證臨床療效，2006年3月以來(lái)以龍腦為指標(biāo)，對(duì)珍珠滴丸中的冰片含量測(cè)定進(jìn)行研究，為制劑質(zhì)量評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究提供依據(jù)。

　　1儀器與試藥

　　島津GC-14B氣相色譜儀，氫火焰離子化檢測(cè)器;龍腦對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，含量：89.1%，批號(hào)：881-200001)。

　　2方法與結(jié)果

　　2.1色譜條件色譜柱為FFAP大口徑石英毛細(xì)管柱(30m×0.53mm，0.5μm)，載氣為高純氮?dú)?99.999%)，柱前壓20kPa，柱溫為130℃，進(jìn)樣口溫度220℃，檢測(cè)器溫度250℃;氫氣(99.99%)流量為40ml/min;空氣流量為400ml/min，進(jìn)樣0.5μl[3]。

　　2.2內(nèi)標(biāo)液制備取水楊酸甲酯適量，精密稱定，用70%乙醇制成0.8g/L的內(nèi)標(biāo)液[4]。

　　2.3對(duì)照品溶液的制備取龍腦對(duì)照品適量，精密稱定，加內(nèi)標(biāo)液制成1.25g/L，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。

　　2.4供試品溶液的制備取本品0.5g，精密稱定，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)液適量，超聲處理10min，放冷，用內(nèi)標(biāo)液稀釋至刻度，搖勻即得。

　　2.5系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分別吸取龍腦對(duì)照品溶液、制劑供試品溶液和不含冰片的陰性對(duì)照液各0.5μl注入氣相色譜儀，記錄色譜。從圖1中可見(jiàn)，龍腦的保留時(shí)間約為4.1min，內(nèi)標(biāo)物(水楊酸甲酯)的保留時(shí)間約為5.4min，在本試驗(yàn)條件下龍腦、內(nèi)標(biāo)物與其他組分峰的分離度均大于1.5，陰性對(duì)照不干擾測(cè)定。

　　2.6線性關(guān)系考察精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液1、1.5、2、2.5、3ml置5ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)液稀釋至刻度，搖勻，分別吸取上述系列溶液0.5μl注入氣相色譜儀中，測(cè)定。以龍腦和內(nèi)標(biāo)物峰面積比值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，計(jì)算線性為Y=1.709X-8.2×10-4，r=0.9999，線性范圍為0.25～0.75g/L。

　　2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取供試品，按2.4制備供試液，在0、1、2、4、8h分別進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，平均峰面積比(龍腦峰面積/內(nèi)標(biāo)峰面積)的RSD為1.3%，表明供試品溶液中龍腦在8h內(nèi)穩(wěn)定。

　　2.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取供試品，按2.4法制備5份供試液，分別進(jìn)樣，測(cè)定。結(jié)果龍腦的平均含量為2.548%，RSD為1.4%。

　　2.9精密度實(shí)驗(yàn)取供試品，按2.4法制備供試液，分別進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，平均峰面積比值的RSD為0.95%。

　　2.10加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已測(cè)定龍腦含量的制劑(平均含量2.548%)9份，分別精密加入龍腦對(duì)照品適量，按2.4法制備供試液，分別進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。表1制劑供試品中龍腦的回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)

　　2.11樣品含量測(cè)定按制劑供試液方法制備供試液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定。3批樣品中龍腦的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。表23批試樣品中龍腦含量測(cè)定結(jié)果(略)注：A:室溫留樣龍腦含量變化;B:30℃加速試驗(yàn)龍腦含量變化;C:40℃加速試驗(yàn)龍腦含量變化

　　2.12制劑中冰片穩(wěn)定性考察[5]為考察制劑中冰片的穩(wěn)定性，取上市包裝樣品，分別置室溫(30±2)℃、(65±5)%RH和(40±2)℃、(75±5)%RH下放置，以制劑中龍腦含量為指標(biāo)，考察冰片的穩(wěn)定性，結(jié)果見(jiàn)圖2。

　　從圖2結(jié)果可見(jiàn)，制劑中龍腦在室溫和30℃下放置12個(gè)月基本穩(wěn)定，高溫下放置不穩(wěn)定。因此制劑存放應(yīng)盡量避免高溫環(huán)境。

　　3討論

　　色譜柱是氣相色譜分離的關(guān)鍵。我們?cè)�用填充柱進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果柱效較差，分離時(shí)間較長(zhǎng)。以FFAP采用大口徑毛細(xì)管柱對(duì)冰片進(jìn)行分離，結(jié)果柱效高，分離度好，龍腦、異龍腦和內(nèi)標(biāo)物峰完全達(dá)到基線分離，是測(cè)定冰片較為理想的色譜柱。冰片具有揮發(fā)性，如貯存環(huán)境不當(dāng)，易造成損失[6]。珍珠滴丸的穩(wěn)定性研究表明，在常溫密閉包裝條件下，珍珠滴丸中的冰片在室溫條件下一年內(nèi)基本穩(wěn)定。珍珠滴丸中的冰片采用超聲提取，簡(jiǎn)化了制備樣品的方法，提高了分析的速度，并且輔料及其它干擾少，提取率高，可用于氣相色譜測(cè)定。該方法簡(jiǎn)便易行，靈敏度高，重現(xiàn)性好，回收率高，可作為本品的質(zhì)量控制指標(biāo)之一。

　　【參考文獻(xiàn)】

　　[1]馬琳，王永林，王愛(ài)民，等.珍珠滴丸藥效學(xué)及急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].中外健康方摘：醫(yī)藥月刊，2007(8)：55.

　　[2]張貴君.現(xiàn)代實(shí)用中藥鑒別技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：306.

　　[3]王愛(ài)民，黃勇，王永林，等.大口徑毛吸管柱氣相色譜法測(cè)定菊黃上清含片中龍腦的含量[J].中國(guó)中藥雜志，2006(2)：159.

　　[4]朱小紅，孟新芳，劉芳，等.氣相色譜法測(cè)定吲哚美辛三七冰片栓中冰片的含量[J].藥物分析雜志，2006(11)：1615.

　　[5]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2005年版(二部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄176.

　　[6]黃衛(wèi)東.冰片的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥業(yè)，2008(4)：64